重磅！新的基果编纂东西-SpaCas9

赖良学/李占军课题组恒久致力于基因编辑技能的优化及其在人源化动物模子中的应用。2021年6月23日，该组在Molecular Therapy上颁发研究型文章Versatile and efficient in vivo genome editing with compact Streptococcus pasteurianus Cas9，开辟并优化了新的基因组编辑东西-SpaCas9，并将之应用于动物模子的构建和体内基因治疗。

因为现在遍及利用的基因组编辑东西SpCas9凌驾4.7kb，难以应用于All-in-one AAV介导的基因治疗；而其他小Cas9也面对着庞大PAM限定、特异性等题目。是以，研究者重新判定和优化了一种小Cas9基因编辑体系-SpaCas9，其具有奇特的NNGYRA PAM，扩大了小Cas9的靶向范畴。颠末对SpaCas9载体的暗码子优化，对Scaffold和Spacer长度的优化，明显进步了基因编辑服从。经平行比力，SpaCas9介导的基因敲除服从与现在代表性的SaCas9和SauriCas9相称。别的，SpaCas9介导的CBE和ABE体系也都能有用地在人细胞和小鼠胚胎中举行碱基编辑，设计的SpaCas9-HF版本明显进步了特异性。研究者还进一步确定了AcrIIA5，AcrIIA6，AcrIIA16能有用按捺SpaCas9及其碱基编辑器，可作为SpaCas9的调治开关。

为了证明SpaCas9体系的有用性，研究者通过mRNA显微注射技能乐成构建了白化病的基因编辑小鼠。别的，将SpaCas9及其相应sgRNA举行 All-in-one AAV包装有用的编辑了成体小鼠肝脏的Pcsk9基因，低落了血清胆固醇程度，证明白该体系应用于基因治疗的潜力。

动物科学学院博士研究生刘志权，陈思宇为论文配合第一作者。赖良学，李占军传授为配合通讯作者。

原文链接：

http://doi.org/10.1016/j.ymthe.2021.06.013

制版人：十一

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