推翻！癌卵白过多，也能害去世癌细胞

撰文 | Qi

染色体重排每每导致基因融合，此中也包罗作为驱动肿瘤产生的癌卵白，如慢性髓系白血病中的融合激酶BCR/ABL1，以及Ewing赘瘤中的融合转录因子EWS/ETS。针对融合激酶的按捺剂已被证明具有临床疗效【1】，但开辟靶向转录因子的小分子按捺剂仍存在困难。近来，卵白质降解已经成为一种针对这些具有挑衅性的癌卵白的计谋，但调治融合转录因子稳健性的机制通常是未知的。

2021年7月29日，来自美国丹娜-法伯癌症研究所的Kimberly Stegmaier团队在Cancer Cell杂志上颁发了一篇题为 TRIM8 modulates the EWS/FLI oncoprotein to promote survival in Ewing sarcoma 的文章，这项研究通过CRISPR-Cas9筛选，确认了EWS/FLI作为TRIM8作为E3毗连酶的新底物，TRIM8基因敲除导致的EWS/FLI卵白程度升高会引起对Ewing赘瘤细胞的毒性。这项研究提供了一个可行的计谋，即使用癌基因过量治疗Ewing赘瘤和潜伏的其他融合转录因子驱动的癌症。

为了确定卵白降解计谋是否可以用于融合TFs的靶向治疗，作者研究了EWS/FLI在Ewing赘瘤中的稳健性调控机制。为此，作者构建了一个表达EWS/FLI GFP IRES-mCherry的293T细胞系模子，该模子可以陈诉EWS/FLI卵白的稳健性改变情形。在此底子上，作者举行了CRISPR-Cas9筛选以确定EWS/FLI卵白稳健性的调治因子。效果表现，靶向TRIM8的sgRNAs在GFPhigh亚群中体现出唯一明显的富集。为了验证这一效果，作者在WT和TRIM8敲除293T细胞中以时间依靠性检测EWS/FLI卵白程度，同等的是，TRIM8敲除细胞中EWS/FLI程度显着更高。

上述试验已经确定TRIM8是293T细胞中EWS/FLI卵白稳健性的调治因子，那么这一机制是否同样实用于Ewing赘瘤细胞呢？作者分别用CRISPR和siRNA敲除和按捺TRIM8表达，并观看到EWS/FLI表达增添，以及已知EWS/FLI靶基因NKX2-2表达增添。别的，TRIM8过表达以浓度依靠的方法导致EWS/FLI程度的低落，且TRIM8的E3毗连酶活性是调治EWS/FLI所必须的，由于TRIM8环布局域缺失突变体（TRIM8ΔRING）的过表达并不克不及下调EWS/FLI的表达。

只管癌基因可以促进癌细胞存活，但它们也同样可以诱导朽迈和凋亡【2】。那么EWS/FLI的表达加强是否也对Ewing赘瘤有害呢？为此，作者用dox诱导的EWS/FLI构建了多个尤文赘瘤细胞系，有味的是，EWS/FLI的过表达可以在体外按捺肿瘤细胞生长并促进凋亡，将这些细胞移植到小鼠体内也同样表现出肿瘤的生长耽误。依据以上效果，可以推测出EWS/FLI遵照“金发密斯原则”，TRIM8可以严厉调控EWS/FLI并将其维持在“恰如其分”的卵白质程度，以促进Ewing赘瘤细胞的存活。

E3毗连酶通知识别其底物上的特定“degron（降办理定子）”举行相互作用。这些degrons可以以多种情势存在，包罗短肽序列或特定的布局基序。为了找到EWS/FLI上的degron，作者先是分别构建了融合的N端或C真个缺失突变体，观看到ΔC1和ΔC5突变体对TRIM8介导的降解具有抗性，提示C1和C5布局域中大概存在degron从而促进EWS/FLI有用的泛素化和降解。

总的来说，这项研究证明白Ewing赘瘤细胞中的EWS/FLI融合癌卵白是E3毗连酶TRIM8的新底物，TRIM8的缺失会增添EWS/FLI 卵白程度进而对Ewing赘瘤细胞孕育发生毒性，导致生长耽误和凋亡，进一步证明白癌卵白的“金发女孩原则”——癌细胞存活必要“恰如其分”的程度。是以，辨认和研究融合癌卵白特异性调治因子（如E3毗连酶）的机制值得进一步探究，并大概为治疗干涉提供新的时机。

原文链接：

http://doi.org/10.1016/j.ccell.2021.07.003

制版人：十一

转载须知

【原创文章】BioArt原创文章，接待小我私家转发分享，未经许可克制转载，所登载的全部作品的著作权均为BioArt所拥有。BioArt保存全部法定权利，违者必究。