紫外线杀菌消毒是使用得当波长的紫外线可以或许粉碎微生物机体细胞中的DNA（脱氧核糖核酸）或RNA（核糖核酸）的分子布局，造成生长性细胞去世亡和（或）再素性细胞去世亡，到达杀菌消毒的成效。微生物检测历程中细致事变你相识几多？跟小析姐一路看看吧。

紫外灯杀菌成效查抄

紫外灯在利用历程中辐射强度会渐渐低落，会影响其杀菌成效，故应该定期检测。紫外灯的杀菌有用波长是253.7 nm,其强度可以用中间波长254 nm的紫外线强度计测定。在没有紫外线强度计的情形下可以采纳生物学测试取代。

生物学测试扼要步调如下：选用枯草芽孢杆菌ATCC 9372,制成106CFU/mL~108 CFU/mL浓度的菌悬液；选用经脱脂处置惩罚的0.5 cm x 1.0cm巨细的布片或铝片，高压灭菌后用作载体；每个载体上滴一滴制备好的菌悬液，干燥后备用；将8个染菌载体放于无菌器皿中，置于紫外灯下1 m~1. 5 m处，开启紫外灯照耀，于0.5h、 1 h、 1.5h和2h各取出2个染菌载体，分别投入盛有5ml.缓冲卵白胨水的洗脱液；系列稀释落伍行平板计数；同法取8个染菌载体用做阳性对比，操纵除不经紫外线照耀外与试验组雷同。

杀灭率 =(阳性对比接纳菌数-试验组接纳菌数)×100% / 阳性对比接纳菌数

杀灭率大于99.9%时，以为紫外灯杀菌成效及格。

无菌室氛围质量查抄

无菌室氛围质量的查抄应根据采样打算，依据情形对处于空态、静态或正常运行的危险区，利用得当的仪器收罗氛围中微生物，测定并监测危险区氛围的微生物污染。无菌室氛围质量的查抄可以参考GB/T 16293 《医药产业干净室(区)浮游菌的测试要领》和GB/T 25915.7《干净室及相干受控情况 第7部门：断绝装置(干净风罩、手套箱、断绝器、微情况)》。

氛围悬浮微生物的采样和计数要领多种多样，依据所需采样目标决定详细的采样要领和采样器。因采样器的收罗服从差别，应慎重选择符合的要领和设置装备摆设。

采样器分为两类：被动式采样器，如落菌盘；自动式采样器，如滤过采样器、撞击采样器、打击采样器等。

1、沉降法

落菌盘等被动式氛围微生物采样器不克不及丈量氛围中微生物的总数，而是丈量氛围中微生物在外貌的沉降率。只要确定单元时间落菌盘上微生物的数目，再依据落菌盘的袒露面积与袒露时间之间的干系，即可大抵盘算出氛围中微生物的数目。

面积小于30 m2的室内设一对角线取3点，在此中心及两头距墙1 m处各取一点；面积大于30 m2的室内房间四面距墙1 m和中间各安排一个平皿，高度为试验台的高度。造就基平皿开盖袒露10 min,然后盖盖倒放，造就48 h,计数每个平1上的菌落数。

平常监控时，可以设定可担当的菌落数限值。普通无菌室的全部取样平皿上的细菌总数应小于15个。氛围质量精良的无菌室，通常每个平皿上生长的细菌不凌驾2个。

也可以按式(10-2)估算氛围中的细菌浓度：

C=（50000 x N ）/ （A × t）.......( 10-2)

式中：

C一氛围中的细菌浓度，单元为菌落集成单元每立方米(CFU/m3);

A--平板面积，单元为平方厘米(cm2);

t一平板袒露时间，单元为分钟(min) ;

N-均匀菌落数，单元为每1L (CFU/L)。

2、氛围滤过法

氛围采样除了天然沉降法外，还可以利用专门的自动式采样器。自动式采样器可以评估 危险区氛围微生物特性。自动式采样器重要包罗撞击采样器、滤过采样器和打击采样器等。

撞击采样器可以分为狭缝式采样器、离心式采样器和针孔式采样器。狭缝式采样器由附加的真空抽气泵抽气，通过采样器的漏洞式平板，将收罗的氛围喷射并撞击到迟钝扭转的平板造就基外貌上，附着的活微生物粒子经造就后形成菌落，予以计数。离心式采样器因为内部风机的高速扭转，气流从采样器前部吸入从后部流出，在离心力的作用下，氛围中的活微生物粒子有充足的时间撞击到专用的固形造就条上，经造就后形成菌落，予以计数。

过滤式氛围采样器是最常用的、最简洁的氛围采样器。过滤式采样器由采样头、滤器、流量计和抽气泵构成。

开动电机后，抽气泵事情，动员氛围吸入采样头，氛围通过滤器的时间，大于滤膜孔径的颗粒就被阻留，当到达预先设定吸气体积后抽气泵制止事情，将滤膜取出转贴到造就基上，造就后盘算氛围中的微生物浓度。过滤式采样器捕捉服从高，但是滤膜质料大概影响微生物的存活率，另有采样阻力大、流量易变的缺陷。

无菌室物体外貌微生物污染查抄

外貌微生物污染的查抄必要利用打仗器或拭子，得到某外貌某时间点的微生物数目。

打仗器以容器内已知面积的固态营养介质与外貌打仗，打仗面积应大于20 cm2,匀称用力将整个营养介质压住外貌几秒钟，不得移动。然后将装置放回容器内，再干净被采样外貌，扫除残留营养物。打仗器造就后展现的菌落可以给出原外貌微生物存活状态的镜像“图”。

利用拭子更为简洁和机动，用拭子擦拭某个外貌，它抹去的微生物数目就可盘算出了。对打仗装置触及不到的、不屈或有凹陷的非汲取性大外貌，用拭子采样格外便利。棉拭子的操纵要领如下：

预备质料：自制无菌棉拭子或购置商品化的无菌棉拭子(见图10-12)、内径10cm x 10 cm无菌规格板、无菌生理盐水、造就基平皿。

假如取样物体是平面的，将无菌规格板放在物体外貌，用浸湿的无菌棉拭子在无菌规格板空心处反正涂抹匀称，涂抹时随之转动棉拭子，剪去棉拭子与手打仗部门，将棉拭子放入装有必然体积的无菌生理盐水中待检。

采样管敲打80次以上使棉拭子上的细菌充实扩散，作得当稀释，举行平板计数，37 ℃造就48 h计数，见式(10-3)。

细菌总数(CFU/m2)=（平皿上菌落均匀数 × 稀释倍数 ）/采样面积 (cm2).......( 10-2)

【例10.1】某操纵台面采样面积100 cm2 ,棉拭子放入10 mL生理盐水，从中取1 mL检测，平皿上均匀菌落数为5个。则细菌总数为：

5x10/100=0. 5(CFU/cm2)

假如取样物品外貌不规章大概物品采样面积不敷100 cm2 ,取整件物品举行棉拭子涂抹取样，别的步调同上，见式(10-4)。

细菌总数(CFU/件) =平皿上菌洛均匀数×稀释倍数 / 件.......(10-4)

职员打仗面无菌查抄

职员与检测工具的打仗面重要是手。

被检职员洗手消毒后，五指并拢。将浸泡过的棉拭子沿双手指屈面从指根到指端来回涂擦2次(每只手涂擦面积约30cm2),涂擦的同时转动棉拭子。剪去操纵者手打仗部位，将棉拭子放入装有必然体积的无菌生理盐水中待检。

按“无菌室物体外貌细菌污染查抄”的要领举行样品处置惩罚、接种、造就、计数和陈诉效果。

（内容泉源：网络 由小析姐整顿编辑）